梅尼埃病(Ménières disease)是一種特發(fā)性內(nèi)耳疾病,在1861年由法國(guó)醫(yī)師Prosper Ménière首次提出。該病主要的病理改變?yōu)槟っ月贩e水,臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的旋轉(zhuǎn)性眩暈、波動(dòng)性聽力下降、耳鳴和耳悶脹感。本病多發(fā)生于30～50歲的中、青年人,兒童少見。男女發(fā)病無(wú)明顯差別。雙耳患病者約占10%～50%。目前已知的病因包括以下因素:各種感染因素(細(xì)菌、病毒等)、損傷(包括機(jī)械性損傷或聲損傷)、耳硬化癥、梅毒、遺傳因素、過(guò)敏、腫瘤、白血病及自身免疫病等。

豚鼠自身免疫免疫性梅尼埃病模型采用同種內(nèi)耳抗原免疫豚鼠,部分動(dòng)物能夠?qū)νN內(nèi)耳抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答,導(dǎo)致了單側(cè)或雙側(cè)聽力受損,并出現(xiàn)眼震等梅尼埃病癥狀。 

模型制作方法:豚鼠,體重350g-400g,雌雄兼用。

抗原制備  同種內(nèi)耳抗原(GPCAG)取自豚鼠新鮮期骨。處死豚鼠后立即在解剖顯微鏡下取出迷路組織,置放與4℃0.01mol/l PH7.2的PBS中搗碎,勻漿,2500r/min離心10min,取上清液在751紫外分光光度計(jì)測(cè)定蛋白的含量,將蛋白濃度調(diào)到1200ug/ml。制成后立即免疫動(dòng)物或加1/10000NaN3低溫保存。

豚鼠免疫方法  以同種內(nèi)抗原400ug/0.05ml+CFA0.5ML,于豚鼠后足及背部皮下注射,第14天重復(fù)注射1次;第28天GPCAG 400ug/0.5ml+CFA0.5ml,于豚鼠背部多點(diǎn)皮下注射,第42天重復(fù)第28天注射1次。免疫后第9周檢測(cè)動(dòng)物模型是否成功。

觀測(cè)指標(biāo)與分析:

 (1)、白細(xì)胞移動(dòng)抑制試驗(yàn);

(2)、血清抗特異性內(nèi)耳抗體;

(3)循環(huán)免疫復(fù)合物;

(4)、耳蝸電圖測(cè)試耳蝸微音電位和AP;

(5)內(nèi)耳石蠟切片;

(6)、內(nèi)耳酶免疫組化學(xué)。如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)符合四個(gè)條件,即判斷為動(dòng)物模型成功。